細胞因子檢測試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗單克隆抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、檢測樣本和生物素化的單克隆抗體,經過孵育,樣本中存在目的蛋白與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(S-HRP)。洗滌后,加入顯色底物TMB,避光顯色。終止液終止反應,在450nm波長(參考波長570-630nm)測定吸光度值。顏色反應的深淺與樣本中存在目的蛋白濃度成正比。
細胞因子檢測試劑盒樣本要求:
1.細胞培養上清(胞外)
2.體液(血清/血漿、胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等各種積液)
3.分泌物(淚液、唾液、乳汁等)
4.排泄物(尿液、糞便)
5.細胞裂解物和組織裂解物
細胞因子檢測試劑盒細胞因子主要是指由內分泌細胞分泌的一類可以參與免疫應答的蛋白多肽。對于細胞因子的檢測方法主要有三種:細胞生物學檢測、免疫學檢測和分子生物學檢測。細胞因子的發現依賴于其生物學活性,因此,建立了生物分析法用于細胞因子的檢測。隨后,用于檢測實驗溶液(如組織培養上清液)中細胞因子的免疫分析法被建立,并不斷用于實驗室研究。但準確地、可重復地測定細胞因子具有一定困難,主要原因是細胞因子的含量極低(大部分都是以pmol/L計),同時存在著源于異嗜性抗體,類風濕因子以及特異的和非特異的細胞因子結合蛋白等的顯著干擾。