人表皮癌細胞A-431在抗胸腺細胞球蛋白、血清處理的NIH瑞士小鼠中形成類似于惡性黑素瘤的快速增長的皮下腫瘤，在普通成纖維細胞和瓊脂上形成克隆。這是一個超三倍體人細胞株。
人表皮癌細胞A-431操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5%CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
人表皮癌細胞A-431培養方法如下：
1、將細胞稀釋到1000個細胞/mL，接種到24孔板，每孔1ml。
2、接種后第二天在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內進行篩選。
3、每隔3天跟換1次培養液，保持G418濃度不變。
4、選擇出在10~14天內使全部死亡的G418濃度來進行下一步的篩選試驗。由于每種細胞對G418的敏感性不同，一般變動在100ug/ml～1000ug/ml范圍。
