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簡(jiǎn)要描述:U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞介紹:種屬:人;貼壁生長(zhǎng);生長(zhǎng)周期:3~4天細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品型號(hào): YKLU-87 MG
所屬分類:細(xì)胞庫(kù)
更新時(shí)間:2024-04-30
U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞介紹:
種屬:人;貼壁生長(zhǎng);生長(zhǎng)周期:3~4天
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟:
【瘤細(xì)胞懸液接種】
1)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良HAO(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞;
2)在PBS中將瘤組織碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液;
3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍;
4)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml;
5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些;
6)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。
【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí),腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下:
1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);
2)消毒動(dòng)物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞;
3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號(hào)針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;
4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>