293F人胚腎細胞293F人胚腎細胞
293F (人胚腎上皮細胞)生長條件:
培養基 | 90%高糖DMEM+10%FBS |
血清 | 10% FBS (Diagnovum ) |
溫度 | 37 ℃ |
空氣條件 | 5% CO2,95% AIR |
凍存條件 | 培養基50%、血清40%、DMSO 10% |
五、組成:
組成 | 規格 |
細胞一瓶 | T25 |
細胞培養與操作說明 | 1份 |
六、293F (人胚腎上皮細胞)接收后的操作流程與注意事項
1. 細胞收到后建議在培養箱穩定4小時左右再依據細胞密度,換液培養或傳代。
2. 如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞及時離心,加15%血清的培養基到新的培養皿/瓶中繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的培養基,培養2-3天。若3天后細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡,請及時聯系實驗室,技術人員會跟進解決。
3. 貼壁細胞生長緩慢:適當提高血清濃度(最高不超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮YM消化后,轉移到新的培養瓶繼續培養。
4. 生長不均:貼壁細胞若出現生長不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重新打散細胞,加入新鮮培養基進行培養。
七、293F (人胚腎上皮細胞)常規培養傳代流程(請嚴格遵守無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加1~2 ml 0.25% EDTA的YM消化(注意把握消化時間,通常控制在1~2min)。
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁運動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ鬥M,加6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落、吹散。
3. 取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,于培養箱中培養。
4. 注意培養基PH值變化情況,定期換液,待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。
293F (人胚腎上皮細胞)特別注意:(如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養,建議添加雙抗培養)
1. 收到細胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養基,切勿使用原瓶中運輸用培養基。
2. 如簽收時出現培養瓶壁破裂,漏液等情況請及時拍照并聯系實驗室。
3. 細胞任何售后問題,均需拍照存檔并及時聯系客服。ZYC3049 小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31 形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養條件:MEM/F12 +10% FBS