GES-1人胃黏膜上皮細胞
GES-1人胃黏膜上皮細胞
運輸及保存條件
活細胞常溫運輸,接收后請立即放入細胞培養箱培養。
凍存細胞干冰運輸,接收后請放入液氮中保存,或立即復蘇。
細胞特性
來源:胃粘膜。
形態:上皮細胞樣。
培養特性:貼壁生長。
支原體、細菌、真菌檢測為陰性。
wan全培養液主要成分
DMEM + 10% fetal bovine serum +雙抗。
使用方法
細胞復蘇
1.從液氮或干冰中取出凍存管迅速放入37℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內使其wan全融化。
2.吸出細胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量wan全培養液重懸細胞后接種于25 cm2培養瓶中,置37℃,5% CO2細胞培養箱中培養。
細胞傳代
1.當細胞長到80%-90%融合時,棄去培養上清,用PBS(不含鈣、鎂離子)洗細胞1-2次。
2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,當細胞大部分變圓并脫落時,加入1 mlwan全培養液終止消化。
3.輕輕吹打后吸出細胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量wan全培養液重懸細胞后按1:3比例接種于25 cm2培養瓶中,置37℃,5% CO2細胞培養箱中培養。
細胞凍存
1.當細胞生長狀態良好時,棄去培養上清,用PBS(不含鈣、鎂離子)洗細胞1-2次。
2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,當細胞大部分變圓并脫落時,加入1 mlwan全培養液終止消化。
3.輕輕吹打后吸出細胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量凍存液(90% fetalbovine serum + 10% DMSO)后重懸細胞。經逐步降溫后轉入液氮凍存。
