HOEC人口腔上皮細胞
HOEC人口腔上皮細胞
培養體系:DMEM高糖培養基+10%FBS+1%雙抗
培養溫度:37℃
二氧化碳濃度:5%
簡介:人口腔上皮細胞HOEC取自女性供體,上皮樣,貼壁培養
注釋:倍增時間54h
接收后的操作流程與注意事項
1.細胞收到后建議在培養箱穩定4小時左右再依據細胞密度,換液培養或傳代。
2.如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞及時離心,加15%血清的wan全培養基到新的培養皿/瓶中繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的wan全培養基,培養2-3天。若3天后細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡,請及時聯系實驗室,技術人員會跟進解決。
3.貼壁細胞生長緩慢:適當提高血清濃度(最高不超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養瓶繼續培養。
4.生長不均:貼壁細胞若出現生長不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重新打散細胞,加入新鮮培養基進行培養。
常規培養傳代流程(請嚴格遵守無菌操作)
1.吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加1~2ml0.25%EDTA的胰酶消化(注意把握消化時間,通??刂圃?~2min)。
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁運動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?,加6~8mlwan全培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落、吹散。
3.取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的wan全培養基,于培養箱中培養。
4.注意培養基PH值變化情況,定期換液,待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存