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簡(jiǎn)要描述：人結(jié)腸癌細(xì)胞；Caco2形態(tài)特性上皮樣細(xì)胞生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)特征特性該細(xì)胞系分離自一個(gè)原發(fā)性直腸癌。 當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)滿時(shí)，表現(xiàn)出典型的腸上皮細(xì)胞分化特征。表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白II，角蛋白陽(yáng)性。
產(chǎn)品型號(hào)： YADS-C-0029
所屬分類：細(xì)胞庫(kù)
更新時(shí)間：2024-04-30
人結(jié)腸癌細(xì)胞；Caco2
人結(jié)腸癌細(xì)胞；Caco2
| 形態(tài)特性 | 上皮樣細(xì)胞 | ||
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | ||
| 特征特性 | 該細(xì)胞系分離自一個(gè)原發(fā)性直腸癌。 當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)滿時(shí)，表現(xiàn)出典型的腸上皮細(xì)胞分化特征。表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白II，角蛋白陽(yáng)性。 | ||
| 培養(yǎng)條件 | DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%FBS | ||
| 傳代方法 | 1:2傳代；3-4天一次 | ||
| 傳代情況 | PN3 | ||
| 凍存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS | ||
| 支原體檢測(cè) | 熒光法（-） | ||
| STR | Amelogenin：X；CSF1PO:11；D13S317:11,14；D16S539:12；D18S51:12；D19S433:15；D21S11:30；D2S1338:17,25；D3S1358:17；D5S818:12,13；D7S820:11,12；D8S1179:12；FGA:19；TH01:6；THOX:9,11；vWA:16,18；D3S1358: 17; TH01: 6; D13S317: 11,14; D16S539: 12; D2S1338: 17, 25; D19S433: 15； | ||
| 同工酶 | 無(wú) | ||
| 染色體 | 88-98 | ||
| 使用權(quán)限 | A類 | ||
一、準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備工作對(duì)開(kāi)展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要，工作量也較大，應(yīng)給予足夠的重視，推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無(wú)法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無(wú)菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。
二、取材
在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞（視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?jīng)過(guò)一定的處理（如消化分散細(xì)胞、分離等）后接入培養(yǎng)器血中，這一過(guò)程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無(wú)取材這一過(guò)程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的shou次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。 理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng)，實(shí)際上幼體組織（尤其是胚胎組織）比成年個(gè)體的組織容易培養(yǎng)，分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng)，腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理，盡快培養(yǎng)，因故不能馬上培養(yǎng)時(shí)，可將組織塊切成黃豆般大的小塊，置4℃的培養(yǎng)液中保存。取組織時(shí)應(yīng)嚴(yán)格保持無(wú)菌，同時(shí)也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理組織和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時(shí)容易帶菌，為減少污染可用抗菌素處理。
三、培養(yǎng)
將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過(guò)程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng)，則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部，幾個(gè)小時(shí)后組織塊可貼牢在底部，再加入培養(yǎng)基。如系細(xì)胞培養(yǎng)，一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，按要求以一定的量（以每毫升細(xì)胞數(shù)表示）接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)器皿后，立即放入培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞盡早進(jìn)入生長(zhǎng)狀態(tài)。 正在培養(yǎng)中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時(shí)間觀察一次，觀察的內(nèi)容包括細(xì)胞是否生長(zhǎng)良好，形態(tài)是否正常，有無(wú)污染，培養(yǎng)基的PH是否太酸或太堿（由酚紅指示劑指示），此外對(duì)培養(yǎng)溫度和CO2濃度也要定時(shí)檢查。 原代培養(yǎng)一般有一段潛伏期（數(shù)小時(shí)到數(shù)十天不等），在潛伏期細(xì)胞一般不分裂，但可貼壁和游走。過(guò)了潛伏期后細(xì)胞進(jìn)入旺盛的分裂生長(zhǎng)期。細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底后要進(jìn)行傳代培養(yǎng)，將一瓶中的細(xì)胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培養(yǎng)。每傳代一次稱為“一代"。二倍體細(xì)胞一般只能傳幾十代，而轉(zhuǎn)化細(xì)胞系或細(xì)胞株則可無(wú)限地傳代下去。轉(zhuǎn)化細(xì)胞可能具有惡性性質(zhì)，也可能僅有不死性（Immortality）而無(wú)惡性。
四、凍存及復(fù)蘇
為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度－196℃，將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑（一般為二甲亞砜或甘油）的培養(yǎng)基，以一定的冷卻速度凍存，最終保存于液氮中。在極低的溫度下，細(xì)胞保存的時(shí)間幾乎是無(wú)限的。復(fù)蘇一般采用快融方法，即從液氮中取出凍存管后，立即放入37℃水中，使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。 凍存過(guò)程中保護(hù)劑的選用、細(xì)胞密度、降溫速度及復(fù)蘇時(shí)溫度、融化速度等都對(duì)細(xì)胞活力有影響。
五、常用儀器設(shè)備
無(wú)菌室,超凈工作臺(tái),三重純水蒸餾器,抽氣泵,壓力蒸氣消毒器,電熱恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)器具，CO2培養(yǎng)箱,恒溫水浴鍋,倒置顯微鏡,離心機(jī),無(wú)菌過(guò)濾器,洗刷裝置,細(xì)胞計(jì)數(shù)板和電子細(xì)胞技術(shù)儀等等。
